LC 480 qPCR en temps réel haut débit

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Caractéristiques principales du LightCycler480

Le LightCycler 480 est un système de PCR en temps réel.


Les caractéristiques principales sont les suivantes :

  • Ce système est modulaire, il accepte 2 types de blocs PCR :
    96 ou 384 puits
  • Durée de PCR :
    La vitesse de thermocyclage combiné au système de détection par caméra CCD permet de réaliser des PCR de 45 cycles en moins de 60min.
    Cette vitesse de thermocyclage est liée à la rapiditité du thermobloc à effet Peltier dont les spécifications sont les suivantes :
    • montée en température : 4,8°C/s (vitesse moyenne)
    • descente en température : 2,5°C/s (vitesse moyenne)
  • PCR réalisée avec des réactifs SybrGreen ou sondes adaptés au thermocyclage rapide.
  • Volume d'échantillon possible:
    • bloc 96 puits : 10-100µl
    • bloc 384 puits : 3-20µl.
  • Courbe de fusion:
    Le système permet de réaliser simultanément les courbes de fusion de tous les échantillons, pour un maximum de 100 mesures de fluorescence par °C permettant d'obtenir des courbes de fusion haute résolution (HRM) pour la détection de polymorphisme génétique.
  • Le système de détection a les spécifications suivantes :
    • excitation par une lampe au Xénon (435 – 630nm) – durée de vie >500h
    • détection par une caméra CCD (490-680nm) sensibilité - <0,4nmol/l fluoresceine
    • filtres
      • longueurs d’onde d’excitation : 450, 483, 523, 558, et 615nm
      • longueurs d’onde de détection : 500, 533, 568, 610, 640 et 670nm
      • Les longueurs d’ondes 450nm pour l’excitation et 500nm pour la détection sont compatibles pour l’utilisation du LC Green et LC Green+.  

Modes d'emploi et notes d'application :

Site Roche, section RTPCR :  https://www.roche-applied-science.com/sis/rtpcr/index.jsp

Site Roche, Dessin des amorces : https://www.roche-applied-science.com/sis/rtpcr/upl/acenter.jsp?id=030000

Site Primer 3 Plus, pour le dessin des amorces (le disaïgn des praïmeurs): http://www.bioinformatics.nl/cgi-bin/primer3plus/primer3plus.cgi